目標：本研究探討五價無機砷酸鈉[Na2HAsO4， As(V)]對KB細胞毒性及细胞内可與As(V)結合之蛋白。方法：將KB細胞處理不同砷化物後，以原子吸收光譜及高壓液相層析儀測定細胞培養液中砷化物之種類。並將KB細胞之萃取液，通過As(V)-Sepharose管柱，再以As(V)緩衝液，沖提出與As(V)具有專一性結合之蛋白：將沖洗出之蛋白進行膠體電泳、氨基酸序列及酵素活性分析， 以確定蛋白的種類及與As(V)之專一性結合作用。結果：KB細胞攝入三價無機砷(As(III))、單甲基砷(MMA)及雙甲基砷(DMA)後，排出細胞外的砷化物仍分別為As(III)、MMA及DMA。然而，KB細胞在攝入As(V)後，在細胞培養液所測得的主要為As(III)：因此As(V)毒性可能源自於細胞內As(V)被還原成As(III)；而KB細胞對As(V)的還原與GSH無關。此外，KB細胞萃取液通過As(V)- Sepharose後，純化到一個58kDa的蛋白質，經部份氨基酸序列分析後，發現此蛋白質為丙酮酸激酶 (pyruvate kinase)。進一步以酵素活性及西方氏墨點的分析，亦證實此As(V)-Sepharose所純化之酵素為PK：其酵素活性可被As(V)抑制(K=28.3 mM， K=76.3 mM)，顯示PK可能為As(V)於細胞內的作用標的。結論：KB細胞將攝入之As(V)還原成As(III)再排出細胞外，或造成細胞毒性；而PK酵素可能為As(V)在細胞內之結合蛋白。

五價砷化物；結合蛋白；丙酮酸酵素；人類口腔表皮細胞